序論：好文章的創作是一個不斷探索和完善的過程，我們為您推薦十篇生物常用的研究方法范例，希望它們能助您一臂之力，提升您的閱讀品質，帶來更深刻的閱讀感受。

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化工業的迅速發展是推動經濟發展的重點之一，它為其他行業的發展打下基礎，是判斷國家經濟發展狀況的指標。我國工業場所數量越來越多，然而在化工業的生產過程中會伴隨著大量廢水的排放，廢水中常含著許多具有毒性的污染物質，若是缺乏處理或是處理不當就排放到環境中，對環境中的各類生物的生長會產生不良影響，危害到接觸污染物的人類的健康甚至是生命。因此，要根據不同化工產業排放的不同廢水污染物的特點，合理應用各類化工廢水處理技術，將化工廢水中的具有毒性的難以自然降解的物質進行處理，減少因化工廢水排放造成的污染，避免產生社會危害。因此，人們都致力于開發出新的化工廢水處理技術，處理效果好、成本低的化工廢水處理技術的研究越來越多。

1. 現有常用化工廢水處理技術

我國化工廢水中，常常含有大量的有毒物質，不同的化工產業廢水中的有毒物質不同，且一種廢水中所含有毒物質有時不只一種，大多都是多環芳烴、有機物質、重金屬化合物等不能自然降解的物質；廢水中鹽分含量一般大于1%，能抑制水中生物對有機物質的降解；廢水排放的量及廢水中有毒物質的量經常變化。為了將這些有毒物質除去，在廢水處理中常常使用以下幾種處理技術：

1.1物理法

濾過法、沉淀法、氣浮法和吸附法等是常用的物理處理方法，主要是通過物理手段實現固液分離，從而去除廢水中的顆粒性物質，操作比較簡單，但是這種方法對于廢水中的溶解性污染物無法清除，因此多用于預處理以及深處理當中。

1.2化學法

化學氧化法、混凝沉淀法、微電解技術等是常用的化學處理方法，是通過各類化學反應，達到清除廢水中的各類雜質、解除或減小廢水毒性的目的。化學氧化法是利用氧化反應，如利用氧化劑對廢水中的污染物質進行氧化，使廢水中的污染物質變成較易于降解的物質，解除或者減小污染物的毒性，這種方式適用于污染物為還原性強的廢水的處理。氧化劑的氧化性強弱對廢水處理的效果影響比較大，常用的較好的氧化劑有臭氧和氯氣，處理廢水污染物的能力較強，但是成本花費高。混凝沉淀法是利用化學投放具有凝聚作用的化學物質，對廢水中的細小顆粒及膠體沉淀去除，同時對廢水的顏色、微生物和較大分子有機物進行清除，然而這種方式對廢水的pH值、溫度、水量等要求較高，多用于預處理和深處理。微電解技術是利用原電池原理，對廢水中的污染物質進行電化學作用，使污染物性質發生改變。電解過程中，同時會產生具有消毒作用的?OH和活性率，可進一步清除廢水中的細菌。微電解技術多用于生物難降解的廢水，而且利用了工業生產中的固體廢棄物，實現了廢物利用，但是微電解技術的研究還稍顯不足，還只能對特殊類別的工業廢水進行處理，還沒形成一套完整的技術和理論。

1.3生物法

常用生物法有投放優勢菌法、共代謝法、活性污泥法和生物膜法，是通過微生物的新陳代謝作用，對廢水中的有機物進行生物轉化，使有機物變性、失去毒性，從而達到去除污染物的目的。投放優勢菌法是選用降解能力較高的菌株，將其投放到廢水處理系統中，讓其對廢水中的污染物進行降解。共代謝法是利用微生物的協同代謝，使不能直接被微生物降解的污染物與微生物降解產物形成共基質條件，將不能直接被降解的物質降解，促進廢水的處理效率。活性污泥法是利用微生物絮體形成的活性污泥，將廢水中的污染物進行吸附和降解。生物膜法是利用生物膜，將廢水中的污染物進行吸附和氧化，從而將廢水進行處理。生物法的成本比較低，操作也比較簡單。但是歲廢水的pH值、溫度、水量的要求較高，且單獨使用生物法的技術處理難度較大，一般會將其與物理化學方法結合使用。

1.4綜合技術

綜合技術是多種技術的結合使用。生物法常常需要與其他方法結合使用，以提高化工廢水處理的效果，這里主要探討物理法和化學法的綜合使用。萃取法、離子交換法和膜分離法等是常用的綜合技術。萃取法是利用污染物在水中和萃取劑中的溶解度不同，使其從廢水中分離，從而從廢水中去除污染物。離子交換法利用水中的離子和離子交換劑相互反應，使有害離子物質從水中去除。膜分離法是利用半透膜，對廢水中的分子進行過濾，進行反滲透，去除水中的固體物質和膠狀物質，這種方法簡單方便，但是選擇性較強，花費較多，易于發生再次污染。

2.化工廢水處理技術的進展

2.1物理法的進展

目前，人們研究用磁種的剩磁，將其與混凝劑一起使用，增強混凝劑吸附作用，提高顆粒性物質的去除效率，接著用磁分離器使污染物中的有機物分解，這種方法在國外已經開始運用。人們還研究利用聲波技術，通過控制聲波的頻率而對有機物實現分離。非平衡等離子體技術是利用等離子體對有機物進行分解，等離子體可通過高壓脈沖放電或者輝光放電產生。

2.2化學法進展

在化學氧化法方面，對光化學氧化、電化學氧化、聲化學氧化進行研究，在光化學氧化方面進展較大。紫外光催化法是一種光化學氧化法，利用紫外光將廢水中的有機物質進行氧化，已有成功運用的實例。濕化氧化是利用高溫高壓，將廢水中有機物進行氧化，可以用于處理高濃度的難降解廢水，在國外已有應用。超臨界水氧化法是利用水的臨界點，將有機物分解為水和二氧化碳，處理能力強大，被視為最值得研究的化工廢水處理技術。

2.3生物法的進展

自然界的微生物對廢水中的污染物降解能力比較差，利用高效優勢菌菌株選育對細菌進行篩選，選出高效優勢菌，可以提高細菌的降解效率。而為了提高高效菌的濃度，利用固定化生物技術，將篩選出的高效菌中的降解活性物質進行固定化，保持菌株的高效降解能力。

3.總結

化工廢水處理技術近年來得到了更多的運用，也得到了更多的發展。目前國內主要使用物理、化學和生物的方法對化工廢水進行處理，但是單一的方法難以實現廢水處理目的，常常需要多種技術結合。在今后的研究中，要更加科學地結合各類技術，發展新的技術，提高廢水處理效果、減少除了成本，解決難降解物質的處理問題。■

參考文獻

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隨著高速發展的經濟，環境被化工產品生產污染加劇，人類健康也日益受到危害，保護環境越來越重要，把控這些問題要從源頭上抓起，廢水處理環節尤其重要。目前多達幾千種的常用藥物被我國制藥企業生產，對于常用藥物的不同類別，在藥品原料上，無論是數量還是種類都收有差異的，故而生產過程中產生的廢水有著很大的水質和特點上的不同，這就在處理醫藥化工廢水上有很大的困難，需要多種處理方法結合才能有效提升廢水處理。

一、醫藥化工廢水的類型和特點

目前處理化工廢水難度特別大，尤其是生產精細化工產品過程中排放的結構復雜、生物難以降解和有毒有害的有機物質。在生產常用藥的過程中，一般有四大類型的廢水：一是排放在主要生產過程中的廢水；二是排放在輔助生產過程中的廢水；三是平日工作中的沖洗水；四是生活中員工產生的污水。

化工廢水有其基本特點，主要有四點：一是副產物多，水質成分復雜，反應原料中多為環狀結構化合物或溶劑類物質；二是污染物在廢水中含量高；三是有毒有害物質多，特別是精細化工廢水中的有機污染物對微生物的危害很大；四是有很多生物難降解物質。

目前我國化工廢水的達標排放仍然不理想，研究低成本、高效的新工藝和新技術來處理化工廢水，已經成為各國科學家的研究重點。

二、國內外常用的醫藥化工廢水處理方法

1.物理處理法

過濾法、氣浮法和重力沉淀法等是常用的物理法。過濾法主要是減少水中的懸浮物，用有孔狀的粒料層將水中的雜質截留，在過濾處理化工廢水中，微孔狀慮機和板框過濾機是常用的工具；氣浮法是先生成吸附微小氣泡，然后通過微小氣泡的附裹攜帶將懸浮顆粒帶出水面的方法；重力沉淀法是利用重力場的作用，將水中具有可沉淀性能的懸浮顆粒達到自然沉降，這一過程固液就達到了自然分離。這三種物理處理方法管理方便，工藝簡單，但是在去除可溶性廢水方面有很大局限，還需尋求另外的辦法。

2.化學處理法

化學處理法去除水中的無機物雜質、有機物主要是利用化學反應的作用，主要有化學氧化法、電化學氧化法和化學混凝法等。

化學氧化法通常是在化工廢水中投放氧化劑對有機污染物氧化去除的方法。經過化學氧化還原的廢水，廢水中的有毒物質將轉化成無毒或毒性小的物質，達到了廢水凈化的目的。常用的有空氣氧化和氯氧化。空氣氧化的氧化能力弱，主要用于含有處理還原性強的物質的廢水，氯氣是普遍使用的氧化劑，主要用在處理含氰、含酚等有機廢水。

電化學氧化法是通過在電解槽中，在電極上廢水中的有機污染物發生氧化還原反應被去除，在電解槽的陽極廢水中的污染物失去電子被氧化，在陽極水中的氯離子和氫氧根離子也可放電生成氯氣和氧氣而間接地氧化污染物，在實際操作中，為了使陽極的氧化作用加強，使電解槽的內阻減少，一些氯化鈉被加入到廢水電解槽中，進行電氯化。近年來在電氧化和電還原的新型電極材料方面取得了較大的成效，但是成本高、能耗大等問題仍然存在。

化學混凝法是通過在醫藥化工廢水中投放能夠產生凝聚和絮凝作用的化學藥劑，使膠體形成沉淀，然后被去除；主要的作用對象是水中的膠體物質和微小懸浮物。水溫、水質、水量、PH值等變化對該方法影響較大，對一些可溶性好的無機、有機物質去除率低。

3.生物處理法

生物處理法是通過微生物的新陳代謝作用將有機物降解轉化的過程。伴隨著快速發展的醫藥化學工業，污染物的成分也變得日益復雜，如果僅僅采用物理的或化學的方法很難達到治理的標準。如果微生物的新陳代謝作用能夠被合理的利用，那么廢水中的有機污染物就可以進行轉化與穩定，達到無害化。生物處理方法主要分為厭氧處理和好氧處理兩大類型：厭氧處理是指在廢水中沒有分子氧的條件下，厭氧微生物將廢水中的有機化合物分解轉化為二氧化碳和甲烷的過程。研究表明，水解產酸細菌、產甲烷細菌和產氫產乙酸細菌是完成厭氧過程的三大主要類群細菌。好氧處理分為生物膜法和活性污泥法。生物膜法是將生物膜和廢水接觸，廢水中的有機物被生物膜吸附和氧化的過程。活性污泥法是處理廢水利用懸浮生長的微生物絮體的方法，活性污泥就是微生物絮體，活性污泥是由好氧微生物及其代謝吸附的有機物、無機物組成的，能夠降解廢水中的有機污染物。

三、最新的非常規廢水處理技術

最新的非常規廢水處理技術主要有磁分離法、紫外光催化氧化處理技術和固定化細胞技術。磁分離法是將磁種和混凝劑投放到醫藥化工廢水中，在磁種的剩磁和混凝劑的同時作用下，醫藥化工廢水中的顆粒相互吸引并凝結長大，懸浮物的分離加速，然后有機污染物將在磁分離器的幫助下去除。紫外光催化氧化處理技術是在300～400nm的紫外光照射下并利用二氧化鈦半導體催化劑，形成羥基自由基和產生光電子空穴等強氧化劑的能力，氧化分解廢水中的有機物。固定化細胞技術，是將適宜降解特定廢水的高效菌株通過物理或者化學手段篩選分離出來，保持其活性并且能夠反復利用。

四、總結

有效處理醫藥化工廢水是一項艱巨且長期的任務，對造福人類和環境保護有著重要的意義。在處理醫藥化工廢水的過程中，可以多想辦法、多走路子和多組合利用處理，更大的提高處理廢水的效率。目前，雖然出現了不少新式的處理技術，但是成本高、能耗大。另外，一些新技術的實際應用問題還要考慮到，廢水處理過程中出現的難題要盡量、盡快想辦法解決，使新的突破能夠在醫藥化工廢水的處理方法上實現。

參考文獻

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講述法是教師向學生敘述事實材料或描繪所講對象、現象的方法。生物學中的形態、結構、生活習性、分類及應用等知識，屬于對生物界對象或現象描述的性質，一般都采用講述法。實驗、實習、參觀等的指導也常用此法。初中低年級采用較普遍。講解法是教師向學生說明、解釋或論證概念、原理、規律的方法。生物學中的生理功能（包括生長和生殖發育）、遺傳變異、生命起源和生物進化、生態學等知識。屬于對生物界自然現象說明、解釋或科學論證，一般采用講解法。中學高年級尤高中多采用。

講授法的基本要求： 一、科學性和思想性。二、系統性。三、啟發性和趣味性。四、語言要清晰、準確、精練，并要生動、形象，有感染力，機動性。五、要運用好板書。

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中圖分類號：G642 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2012）04-0219-03

一、開設《蛋白質化學》課程的重要性

21世紀是生命科學的世紀，生命科學的研究中，蛋白質科學的研究是熱點和前沿。2001年，人類基因組草圖由兩個獨立機構描繪出來，分別發表在《科學》雜志和《自然》雜志上，截止到2005年，人類基因組計劃的測序工作也已經基本完成。然而，科學家們很快發現，人類基因組測序工作的完成，并不意味著生命科學研究的終點，相反，一個更具挑戰性的任務放在每一位生命科學工作者的面前：了解基因的功能，即所謂功能基因組學。而蛋白質組學則是功能基因組學的重要研究領域，欲進行蛋白質組學的研究，了解蛋白質化學的相關知識和實驗手段是前提和基礎。目前，各大高校在生命科學學院基本都開設了《生物化學》必修課程，該課程闡述了蛋白質的相關基本知識，然而，對于從事蛋白質相關的創新性實驗研究以及有志于今后從事蛋白質研究的學生來說，《生物化學》課程對蛋白質知識的講授滿足不了科研的需求，因此，在本科高年級進行《蛋白質化學》的授課是非常必要和迫切的。

二、《蛋白質化學》教學體系初探

目前，開設《蛋白質化學》課程的高校并不多，開設了這門課的高校，其教學體系也各有側重，這主要是由于《蛋白質化學》課程的特點是內容多、難度大、更新快。立足于上海大學短學期制的教學實際，想要在短短十周內覆蓋蛋白質化學的所有內容是不切實際的，因此，筆者對這門課程的體系設置所采取的總體指導方針是：立足基礎、把握重點、推陳出新和結合實際。具體課程體系安排如下：

1.蛋白質的結構。這部分內容又分為兩部分：蛋白質結構的理論篇和方法篇。理論篇中，主要對《生物化學》課程蛋白質結構的相關內容進行復習和提升。之所以要復習提高這部分內容，是因為蛋白質結構的相關知識是所有蛋白質研究的起點和基礎，無論是分離純化還是分析鑒定，又或者是研究蛋白質的相互作用，都需要這部分知識的牢固掌握，因此，對這部分基礎內容，筆者認為，需要不遺余力地強化和鞏固。而在教學中，筆者也發現，學生對這部分基礎內容的掌握確實不夠扎實，從氨基酸的英文三字母縮寫，氨基酸在緩沖溶液中的帶電性質，到二十種氨基酸對二級結構的貢獻等，都需要強化記憶。在方法篇中，主要介紹蛋白質結構的研究方法，包括一級結構的研究方法和高級結構的研究方法。蛋白質一級結構的研究方法除了經典的Edman降解法之外，還有目前科研常用的質譜法，這兩種都是直接測序的方法，另外介紹了更高效的間接測序法：基因測序法，也稱重組cDNA技術，即由重組cDNA的序列倒推氨基酸序列。通過蛋白質一級結構的最新研究方法的介紹，使學生直接感受到科技的進步，激發學習的熱情。蛋白質高級結構的研究最有效的兩種手段是X射線衍射和核磁共振法，這兩種方法的適用對象不同，也各有其優缺點。除此之外，對結構已知的蛋白質進行研究時，也可能會用到一些蛋白質結構的研究手段，如圓二色光譜（CD），主要用來研究緩沖環境、配體、離子等對蛋白質二級結構的細微影響。掌握這些內容，對于學生今后從事這方面的研究打下了良好的基礎。另一方面，對已知結構的蛋白質結構信息的有效搜索和了解，對該蛋白的深入研究有很好的輔助作用，因此，對蛋白質數據庫的了解和使用，就顯得尤為重要。豐富便利的網絡資源讓蛋白質數據庫的接近不再困難，如何有效查找相關信息成為學生的必修功課。我們向學生推薦了國際上最完整的也是最常用的蛋白質結構數據庫：PDB數據庫，包含了約7萬個生物大分子的三維結構信息，信息量豐富且查找方便，是蛋白質研究者的利器。PDB數據庫中的蛋白質信息可以下載并進行脫網研究和分析，這就需要一款可以查看和分析蛋白質結構的軟件，Rasmol軟件滿足了這種需求。Rasmol軟件是一款免費的小巧軟件，卻可以達到準專業級的水平。對于普通從事蛋白質研究的人員來說，這款軟件是非常實用的。我們在課程中向同學們介紹了這款軟件，也深得同學的喜愛和贊賞。

2.蛋白質研究的常用手段和方法。在對蛋白質結構知識掌握的基礎上，教學進入下一個非常實用的環節：蛋白質研究的常用手段和方法。這部分內容也可粗分為兩大塊：蛋白質的分離純化方法和分析鑒定方法。在蛋白質研究的常用手段和方法中，首先應該掌握的是蛋白質的分離純化方法，它們是研究蛋白質的必備武器。這部分內容非常豐富，我們重點介紹了兩大手段：聚丙烯酰胺凝膠電泳和蛋白質層析。電泳是生物化學實驗中常用的實驗方法，它既可用于核酸的分離分析，亦可用于蛋白質的分離鑒定。在了解基本的電泳原理的基礎之上，明確各種電泳方法適用的對象以及各種形式的電泳所能夠起到的效果就成了教學的重點和難點。蛋白質層析也包括了一系列的層析方法，如離子交換層析、親和層析、凝膠過濾層析等，各種層析方法的原理不同，所能達到的效果、起到的作用也不盡相同，如何根據研究對象的不同，從而選取有效的層析手段來達到預期的效果就成了解決問題最關鍵的所在。蛋白質的分析鑒定手段也很多，有跟分離純化相關的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、western blot的方法，也有酶聯免疫吸附測定（ELISA）等。由于ELISA方法是基于抗原抗體的免疫反應，所以，教學過程中還要簡單介紹一些免疫學的相關知識，使學生更好地掌握這部分內容。總體而言，在教學中，這部分的重點是對實驗原理的講解，使學生在掌握實驗原理的基礎上明白各種實驗方法如何被正確運用到實際研究工作中去。在缺乏配套實驗教學的情況下，如何讓學生理解這些手段、如何在實際研究中得到運用成了筆者必須直面的問題。對此，筆者采取的方法是讓學生閱讀相關文獻，每講一種實驗方法，就配套一兩篇中英文文獻，文獻的內容以相應的實驗方法為主，并解決了某個科研問題。文獻的接觸以中文文獻開始，慢慢過渡到英文文獻。借助文獻，學生不僅可以牢固掌握相關實驗手段的實驗流程和所能解決的科研問題，也能深入理解實驗方法對科研的意義和重要性，避免了學生學習蛋白質實驗手段的盲目性。此外，文獻還能幫助學生了解最新的科研進展，接觸最新的科研領域，拓寬了專業的視野，為今后的研究打下良好的基礎。

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1《生物統計學》(第一版)

統計學是以概率論為基礎的,因而生物統計學必然與抽象復雜的數學知識相聯系。生物統計學的理論性和實踐性均較強,而且涉及的內容、公式和抽象概念較多,需要一定的數學基礎和較強的邏輯推理能力,但由于生物學科的特點,生物統計學相對應于概率論與數理統計是“拿來主義”,一般不過多討論其數學原理,而是在簡單介紹統計原理的基礎上重點介紹具體分析方法的應用。教學組在多年教學實踐工作的基礎上,1997年在科學出版社出版的《生物統計學》[5]就充分體現了這個特點。書中內容主要側重于各種統計方法的應用,在統計原理方面,一般只作概念上的介紹和公式的簡單推導,對有些較復雜的統計公式則只給出公式,其目的主要是為讓讀者不但對統計學原理有較全面的了解,更重要的是結合實例了解和掌握各種常用統計方法。在內容的編排上,全書共分十二章,概括起來主要有五個方面:第一章至第三章介紹統計和概率的基礎知識,包括生物統計學的概念和內容、數據的搜集與整理、平均數和變異數的計算、概率和概率分布等;第四章、第五章介紹統計推斷,包括樣本平均數的檢驗、樣本頻數的檢驗、方差同質性檢驗、非參數檢驗和檢驗;第六章至第九章介紹統計分析方法,主要內容有方差分析、直線回歸與相關分析、可直線化的曲線回歸分析、多元回歸與相關分析、逐步回歸分析、多項式回歸、協方差分析;第十章、第十一章介紹抽樣與試驗設計,主要包括抽樣誤差估計、抽樣方法、抽樣方案制訂及常見的試驗設計如對比設計、隨機區組設計、正交設計及其相應的統計分析方法;第十二章對多元統計分析進行了簡單介紹。每章都附有一定數量的思考練習題,供讀者參考。

2《生物統計學》(第二版)

根據教學安排和生物統計學應用的需要,在教材使用反饋意見的基礎上《生物統計學》(第二版)[6]于2000年在科學出版社出版。與第一版相比,各章節做了大幅度調整,將全書分為十四章,補充了拉丁方設計和裂區設計兩種試驗設計方法,將抽樣原理和方法、常用試驗設計及其統計分析放在了可直線化的非線性回歸分析之后進行介紹,使章節編排體系更符合讀者學習的要求。第一章至第三章分是基礎理論,包括概論、試驗資料的整理與特征數的計算及概率與概率分布。第四章至第六章介紹了具體的統計分析方法,分別是統計推斷、檢驗和方差分析。第七章、第八章主要介紹試驗設計的相關內容,包括抽樣原理與方法、常用試驗設計及統計分析。前面所涉及的統計分析內容主要是針對一個變量而言,之后的章節則主要介紹兩個及多個變量的分析方法,第九章、第十章是關于一元回歸和相關的內容,分別是直線回歸與相關分析、可直線化的非線性回歸分析。第十一章至第十四章介紹了協方差分析、多元回歸與多元相關分析、多項式回歸分析和多元統計分析簡介。書中增加了對全文關鍵詞匯和術語的索引,并在書后附上了各章部分思考練習題的答案。在例題上進行了重新編排,以使所選例題更能反映本章的內容且便于讀者的學習和理解。

3《生物統計學》(第三版)

為適應21世紀生命科學發展和生物學人才培養的要示,在第一版、第二版的基礎上,對教材內容重新進行了編排、審核并增加了部分內容,于2005年在科學出版社出版《生物統計學》(第三版)[7],并被列為21世紀高等院校生物科學系列教材。與之前相比,此版教材突出了以下3個特點:(1)內容豐富:增加了平衡不完全區組設計、倒數函數曲線、通徑分析等內容;(2)編排科學:全書分解為十六章,各章節的安排更加注重了內容的循序漸進,并在每章之首增加了本章提要,總結該章節的主要內容,并列出了難點和重點;(3)針對性強:內容突出了本教材主要作為生物學專業教材這個重點,所選例題均為均為生物學試驗中的案例。另外,隨著計算機統計軟件的發展和應用,統計軟件是在統計學研究中必不可少的應用工具。目前的統計學軟件,相關的統計分析方法及術語多以英文形式給出,只有掌握了相關術語的英文表達,才能更好地應用軟件,否則只會導致統計分析的誤用。在此版的修訂中,對主要概念和術語增加了英文標注,并重新編排了中英文對照索引,以便于學習和檢索。此版還對統計分析中學生易引起歧義的內容進行了修訂,例如,方差分析是統計學常用的分析方法之一,對方差分析基本原理的理解是正確運用方差分析的前提。在教學中,要求學生正確理解方差分析中的處理數和組內重復數的含義和統計學意義。原來的教材中,例題中的處理數k和每處理下的重復數n的數量值是一樣的,這樣學生學習起來容易產生混淆,在這次修訂中對例題進行了更換,以使學生很容易掌握n、k的含義及特征。

4《生物統計學》(第四版)

為適應21世紀生命科學發展和生物學人才培養對生物統計學教材的要求,在本書前三版的基礎上,按照“強化基礎、突出重點、注重應用、通俗易懂”的原則對全書內容重新進行了精簡和編排,于2008年出版《生物統計學》(第四版)[1],并被教育部列為普通高等教育“十一五”國家級規劃教材。與前三版相比,本書具有以下特點:(1)突出以本科教學為重點,注重與多數高校生物類專業目前生物統計教學要求的適應,精簡了多元統計分析等部分較深的內容和平衡不完全區組設計、拉丁方設計、非參數檢驗等不常用的內容,將全書縮編為十四章。教材內容更側重于各種統計方法的應用,而對復雜的統計原理只做概念上的介紹和公式的簡單推導,目的是讓讀者在全面了解統計學原理的基礎上,結合實例了解和掌握各種常用統計方法。(2)根據生命科學研究的發展和要求不斷進行補充和調整教材內容,在內容結構安排方面,對全書各章節進行了部分調整,將直線回歸與相關分析、可直線性的非線性回歸分析放在抽樣原理與方法和試驗設計的前面,以使本書更加系統,便于本課程基本內容的教學。生物統計學分為統計分析和試驗設計兩大部分內容。此版教材在介紹統計學的基本理論之后,全面介紹各種常用的統計分析方法,然后是試驗設計的內容。各章節安排循序漸進,具有一定的深度和廣度。(3)更換和調整了部分例題和習題,對部分表達不甚清晰的部分進行了修訂。在選用例題時,選擇生物學各個分支典型例子,并著重突出生物專業及相關專業教材的重點。同時在各章后附上重新編排思考練習題,教材最后附上中英對照索引,以便于學習和檢索。(4)為了進一步幫助讀者理解和學習此版教材的內容,提高學生自學能力,配合本書編寫了《生物統計學學習指導》一書,以利于學生加強課后實踐練習,實現《生物統計學》教材的立體化。

5《生物統計學學習指導》

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【關鍵詞】藥品生產，無菌制劑，滅菌方法，設備

1 前言

藥品是用來治療、預防、保健的特殊產品，藥品中任何有害微生物的存在，都將危及患者的身體健康甚至生命。無菌藥品就是要求藥品內沒有任何活體微生物的存在，滅菌就是應用物理或化學等方法把物體上或介質中所有微生物及芽胞全部殺滅，從而確保藥品中沒有活體微生物，有效、安全、穩定的保證療效。本文就幾種簡單滅菌方法進行了闡述。

2 藥品生產中的無菌制劑

藥品生產中規定的滅菌及無菌制劑主要包括:注射用制劑、眼用制劑、植入型制劑、創面用制劑以及手術用制劑。

2.1注射用制劑:注射用制劑就是指由藥物制成的專供注入肌體內的一種制劑，例如：注射劑、輸液、注射粉針等。主要由藥物、溶劑、附加劑及特制的容器所組成。由于注射劑為直接注入人體內部，因此對注射劑本身以及注射用溶劑、附加劑和各種載體輔料的質量、穩定性和安全性要求都非常嚴格。

2.2眼用制劑:眼睛是人體最敏感部位之一，現在人們對眼用制劑的需求量越來越大，常用的眼用制劑類包括滴眼液、眼用膜劑、軟膏劑和凝膠劑等。然而普通滴眼液及眼用軟膏均有各自的不足，普通滴眼液使用方便，但用藥后藥效維持短；眼用軟膏劑能維持較長療效，但可能會造成視野模糊。近年來研發的眼部給藥系統主要研究如何改善眼部的生物利用度并且能更好的持續、控釋給藥。

2.3 入劑與其他無菌制劑:植入劑又稱植入給藥系統，即經手術植入或經針頭導入皮下或體內其他部位的控制釋藥制劑。早期植入劑需要手術取出釋藥載體，近年來研究的載體材料大部分為生物降型聚合物，以此制成的植入劑克服了手術取出載體的困難。

其它創面用制劑以及手術用制劑均為無菌制劑。創面用制劑包括用于潰瘍、燒傷部位的溶液劑、軟膏劑和噴霧劑等，手術用制劑包括止血海綿劑和骨蠟等。這些無菌制劑均需要在無菌條件下制的，且所用的基質、藥物、器具、包裝等均應嚴格滅菌。

3 常用滅菌方法及其設備

3.1干熱滅菌:主要方法是干熱空氣滅菌法，可用于除去熱原物質。主要適用于耐高溫但不宜用濕熱滅菌法滅菌的物品，如手術器械、玻璃容器、金屬制品、石蠟、油脂類(油性軟膏基質、注射用油等)、耐高溫的化學藥品。常用干熱滅菌設備為干熱滅菌器(柜、鍋)、隧道式烘箱、凈化雙扉干燥烘箱等。

3.2濕熱滅菌:主要用火焰滅菌法和熱壓滅菌法，一般適用于耐火焰材質(如金屬、玻璃及瓷器等)物品、用具耐高溫和耐高壓蒸氣的所有藥物制劑，瓷器、橡膠塞、濾膜過濾器以及其他遇高溫和潮濕不發生變化或損壞的物品滅菌。常用滅菌設備是手提式、立式、臥式和自動程序控制式熱壓滅菌柜、臥式圓筒形滅菌罐、預真空壓力蒸汽滅菌柜、快速冷卻滅菌器或消毒器立、多功能安瓿檢漏滅菌柜、大輸液水浴滅菌柜等。此方法滅菌能力強，最有效，應用也最廣。

3.3輻射滅菌:輻射滅菌包括電磁波輻射和電離輻射，電磁波輻射包括紫外線、紅外線、微波，電磁波輻射只能使電子處于高能狀態，不能使原子電離，故放出能量低、穿透力弱，對微生物作用不及電離輻射強。最常用的輻射滅菌是γ射線輻射滅菌，然而在研究放射線對微生物作用的同時，還應了解其對藥品本身的性質和成分所產生的影響，以評價輻射物品的安全性。此方法適宜于醫療器械、容器、生產輔助用品、不受輻射破壞的原料藥及成品等。滅菌過程中必須要控制輻射劑量。常用的輻射滅菌裝置包括三部分：輻射源、設有防護壁的照射室、材料搬運裝置。 3.4氣體滅菌:常用的氣態殺菌劑有環氧乙烷、氣態過氧化氫、甲醛、臭氧、甘油等。適用于環境消毒以及不耐加熱滅菌的醫用器具、設備和設施等的消毒，亦用于粉末注射劑。采用環氧乙烷時，還應考慮泄露實驗。選擇氣態滅菌法進行滅菌處理時需要注意滅菌氣體的可燃可爆性、致畸性和殘留毒性。主要的氣體滅菌設備有高效臭氧發生器、環氧乙烷滅菌器及甲醛、臭氧熏蒸等。

3.5過濾除菌:過濾在生產中主要用于驅除雜質而使產品的純度得以提高，過濾精度相對較低。過濾除菌在醫藥食品工業生產中應用很普遍，而除菌過濾還兼除熱原，這就需要按滅菌要求的高低選擇過濾介質。過濾除菌常用于熱不穩定的藥品溶液、氣體、水等的除菌。如一些無菌原料藥、凍干粉針生產除菌。主要過濾設備為微孔濾膜濾器及垂熔玻璃濾器等。

4 結論

可根據藥品生產被滅菌藥品制劑的特性采用一種或多種方法組合滅菌，盡可能選用最終滅菌法滅菌。無菌制劑原則上是制劑中不含任何活的微生物，但絕對無菌既是無法保證也是無法用實驗來證實的。滅菌技術及其應用不僅關系到產品的質量和安全，而且直接影響產品的價格和市場競爭力。因此，選擇合理的滅菌方法以及研究、開發先進的生產設備，對提高無菌和滅菌產品質量及安全性具有重要意義。

參考文獻

［1］ 翁麗．無菌制劑藥品生產過程中的滅菌問題及方法．河北化工，2010（8）：54-55．

［2］ 李龍迪,李敏,李小燕.關于無菌制劑無菌檢查方法驗證的探討.新疆中醫,2010,(01):34-36.

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1臨床生物化學檢驗的概念

所謂臨床生物化學檢驗，就是將生物化學的研究成果及相關新型技術應用到臨床，借助現代化的儀器進行化學成分分析，幫助疾病的診斷及病情檢測，為治療提供確切依據。生物化學定義為研究生物體的化學結構、化學組成、及生命體化學變化的一門學科[1]。主要研究組成生命體的各種蛋白質、核酸和相關酶類的化學組成、結構、代謝、遺傳等方面。應用到臨床上，可以幫助臨床醫師分析患者機體相關化學指，以此來判斷病情、病變程度等等。

2 臨床常用生物化學檢驗技術

隨著現代醫學技術的不斷發展，臨床生物化學檢驗的方法和技術越來越多，也日漸成熟，在臨床工作中起著不可替代的作用。這些新型技術主要包括光譜分析、電化學分析，還有近年來逐漸發展的高效液相層色譜法、生物傳感器等等，下面對臨床常用技術一一介紹。

2.1光譜吸收法紫外可見分光光度發和原子吸收分光光度發是目前普遍應用于臨床的光譜吸收分析技術，主要是利用物質對不同波長的吸收程度不同進行測量的一種定量定性分析技術[2]。光譜吸收的理論基礎是朗伯-比爾定律，物質輻射能的吸收與該物質的濃度與吸收層的厚度有關。

2.2紫外-可見分光光度法此法應用是根據物質分子對波長為200~760nm的吸收特性為原理的定性、定量方法。測定時須設立空白對照，邊長1cm的石英吸收池，可同時測定幾試樣的吸收度該方法操作簡單，而且準確性和重現性較好。

2.3原子吸收分光光度法使待測元素燈所發出特征譜線，該譜線穿過試樣，試樣原子化會產生原子蒸汽，蒸氣中待元素基態原子會吸收該譜線，使之強度降低。最后是利用輻射光減弱程度，求得試樣中待測元素的含量。因背景對輻射光強度的吸收，會對測定結果產生明顯的影響，因此，要將背景吸收對實際測量值的影響降到最低，并在最后結果分析時考慮背景吸收因素。應用火焰法時需選擇適宜譜線，加入適當絡合劑。

2.4電化學分析技術應用電化學的電位、電流、電導等基本原理及現代的實驗技術，測定物質組成及化學含量大小的分析方法。該法具有高準確度，高靈敏度，高選擇性的特點。可以測到10-10mol/l到10-12mol/l的物質，廣泛適用于生物化學檢測。

2.5發射光譜分析技術其主要形式就是火焰光譜法和熒光分析法。火焰光譜將被測物質處于火花的高溫氣態作用下，使被測物質離解成原子或離子，然后激發其解離粒子，發射光譜譜線。此時發出的譜線的強度與被測物質在被測樣品中的含量成正比，可用標準公式來確定其具體含量。熒光分析較火焰法靈敏度高，利用熒光的強弱來測定物質的含量，其測定含量低，可進行微量分析，并對多組分的復雜混合物進行測定。但是，熒光分析測定限制條件較多，要求苛刻，常常需借助特殊儀器進行。

3 發展與展望

臨床生物化學檢驗雖然只有短短十幾年的歷史，但其發展是極為迅速的，自動化生化儀器逐漸普及加上臨床是的廣泛應用大大推動了生物化學檢驗的發展，并對其今后的發展方向起著關鍵性作用。

目前臨床上血氣分析，鈉、鉀等離子含量的測定，最常應用的就是離子電位選擇分析法，該方法選擇性好，靈敏度高，操作簡單，分析速度快，可以做到準確診斷，而且節省檢查時間[3]。其缺點是運行成本較高，因此應用較局限，還并未普及到更多指標的測量，但相信這項技術的研究會越來越進步。

目前臨床生物化學檢驗的發展方向是朝著分子診斷學的方向迅速發展，而且正在不斷深入探究，尋找更加靈敏，特異性更高的診斷方法。隨著現代檢測技術和方法的不斷更新和完善，患者的檢測結果會趨于準確、快速，不管是指治療質量還是預后判斷方面，都會更加完善。

隨著現代臨床生物化學檢驗技術不斷的深入研究與進步，現在還沒有廣泛應用到臨床的電泳技術、高效液相技術、和生物芯片等會慢慢發展并得以廣泛應用，將推動臨床醫學檢驗領域的新的重大歷史性變化。

參考文獻：

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2.過濾過濾的目的是清除水中固態廢棄物、懸浮物及大型水生生物等。常用的過濾器有：機械過濾器、壓力過濾器、砂濾器等。

3.沉淀水中的懸浮物容易吸附在魚鰓上，使其呼吸受阻，同時使水體的混濁度和粘滯性增大，對魚苗孵化不利，故常設置蓄水池先進行沉淀處理。

4.吸附多孔性的固相物質，如活性炭、硅膠、浮石粉等，能吸附水體中的有毒物質（如氨氮）。用高分子重金屬吸附劑吸附水體中的重金屬離子，是目前正在研究的水體凈化新技術。吸附劑的粒徑在0.3～1.2 mm,用于吸附水體中的Cu2+、Zn2+、Pb2+、Cd2+,而并不產生水的二次污染。

5.泡沫分離技術向水中通氣，水中的表面活性物質被微小的氣泡吸附，浮于水面形成泡沫，可去除水中溶解物和懸浮物。但此技術不適用于淡水，只能在鹽度大于5‰的半咸水和海水中使用。以此原理設計的泡沫浮選分離器市場上已有售。

6.磁分離法利用電磁原理對水中重金屬離子等污染物進行電磁分離，是目前較新穎的水處理方法。

二、化學方法利用化學反應來處理水中的污染物或懸浮膠粒。包括凝絮、中和、絡合、氧化還原、消毒等。

1.凝絮用無機或有機化學試劑，使水中的微小顆粒及膠體凝聚成大絮凝體，加速沉淀。常用的凝絮劑有鋁鹽（硫酸鋁、鋁酸鈉、堿式氯化鋁等），以及高分子絮凝劑等。

2.中和改善水的pH值。常用生石灰或石灰水使水呈中性或弱堿性，還能增加水體中鈣的含量，改良底質，并殺滅病原體。pH值過高時，可采用草酸、醋酸等弱酸中和。

3.絡合最常用的是EDTA,主要用于清除水中過高的重金屬離子（如Cu2+），特別是那些魚貝類敏感的重金屬離子。

4.氧化還原一些含氯消毒劑、臭氧、雙氧水、高錳酸鉀等可以與水中的有毒物質（如氰離子、硫離子）發生氧化還原反應，降低或消除毒性，還可以殺滅水中的病原菌。常用的含氯消毒劑有漂白粉、二氧化氯、二氯異氰尿酸鈉、三氯異氰尿酸等。臭氧通過強烈的氧化作用除去水中有機物、鐵、錳、臭味及色度等，但因它對細菌具有極強的殺滅效果，以致水中的有益菌也被殺死，故只用于較特殊的地方。

王博君等、朱福慶研究了臭氧在河蟹育苗中的應用，認為育苗水經臭氧處理后，水中的細菌得到了有效抑制，亞硝酸鹽大幅度降解，能減少換水量；譚洪新等[8]分析了臭氧在水族館水處理中的應用，認為臭氧消毒在大型海洋水族館中已得到普遍應用，而目前在水產養殖中應用較少，主要用于河蟹育苗、刺海參育苗、鮑魚育苗等。

5.用其它消毒殺菌劑常用的有抗生素類、磺胺類、呋喃類、硫酸銅、敵百蟲、甲醛、有機染料、雙鏈季銨鹽、中草藥等。以殺滅水體中的致病生物為主要目標。

三、生物方法利用微生物和自養性植物（如綠色藻類、高等水生植物）改良水質。其原理是這些微生物和植物可以吸收利用水體中的營養物質（殘餌及水產養殖動物的代謝產物），有助于防止殘餌與代謝產物積累所引起的水質敗壞。

1.光合細菌光合細菌是一種以光作能源、以二氧化碳或小分子有機物作碳源、以硫化氫等作供氫體，行完全自養性或光能異養性的一類微生物的總稱。只要有水和光存在，不論環境中有氧或無氧，均能生存繁殖。光合細菌能降低水中氨氮、硫化氫等有害物質，水中投入光合細菌后，有益菌大量增加，形成優勢種群，抑制了病原的繁殖。光合細菌的研究和應用在日本及東南亞等國已相當普及。在國內也有報道，羅氏沼蝦、中華鱉、加州鱸、對蝦的養殖中應用光合細菌，具有改善水質、減少病害、提高養殖經濟效益的作用。光合細菌亦可用作飼料添加劑，它對魚類有較好的助長作用。

2.芽胞菌丁　雷等在養殖水體中加入不同濃度的芽胞菌，待其生長繁殖后測量各項水質指標，結果顯示芽胞菌能夠降低水中的亞硝酸鹽濃度。

3.放線菌上海玉壘環境生物技術有限公司從日本引進一種高科技微生物產品，稱“玉壘菌”。這是一種放線菌。翟士君等曾用S30對溫室養鱉池凈化水質的效果進行了試驗。結果顯示，在鱉的飼養前期使用效果很好。宮興文等把S30與光合細菌結合起來使用，并采用無砂養鱉模式，認為S30主要集中于底質，而光合細菌多分散于水中，故能維持養鱉的良好水環境。

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引 言：隨著國家對環境保護的重視，油脂行業對生產廢水也加強了治理力度。但是目前報道的處理工藝與設備多半適用于大型油廠，而數量眾多的中小型油廠卻因資金、技術、場地、成本等原因難以采用這些處理工藝設備。筆者通過對目前常用的油脂廢水處理工藝進行了比較，提出適合中小型油廠廢水處理的工藝。

一、污水水質水量

中小型油廠生產過程中所產生的廢水主要為油脂廢水，該廢水是一種有機物和乳化油等油脂含量極高、金屬和有毒物質含量低的工業廢水，其COD、BOD、SS含量均很高，但可生化性較好，廢水的排放多為間歇排放，水質水量波動較大，PH值也不穩定。

二、處理工藝選擇原則

針對中小型油廠污水水質、水量變化較大，從業人員的技術水平和管理水平較低，并能以最小的投資和運行費用達到預期處理效果的實際情況選擇適用的處理工藝，使出水達到排放標準，選擇原則如下：

（一）針對中小型油廠污水水質水量變化大的特點，選擇抗沖擊負荷，調節能力強的工藝，并要求工藝成熟可靠。

（二）盡量采用經濟節能型的工藝及設備，減少處理設施的數量；

（三）選擇對操作運行人員的水平要求不高的工藝，同時減少運行人員的數量，進一步減少運行費用。

（四）選擇工藝流程短，占地面積少，以節省土建費和設備費，從而減少總投資。

三、預處理技術

油脂廢水常用的預處理技術有：隔油、氣浮、混凝破乳及水解法。

（一）隔油

隔油池為自然上浮分離裝置，常用的有平流式和斜板式，主要用于去除廢水中上浮分散油和部分懸浮物，可能除去的最小油滴粒徑為100-150μm。通常進入隔油池的廢水，含油量越高，油粒徑就越大，利用隔油池處理的效果就越好。雖然隔油池對分散油的去除效果非常好，但對乳化油的處理效果就相對較差，所以要向油脂廢水中投入破乳劑，將乳化油轉變為分散油再進行處理，就可達到理想的效果。在常用的隔油池中，平流式隔油池占地面積大，廢水停留時間長，除油效果差。目前采用多層波紋板隔油池，縮短油粒上浮距離，避免返混，提高了除油效率。

（二）氣浮

氣浮與隔油的最大區別是，隔油是依靠自然上浮，而氣浮則是利用微氣泡，實行強制上浮。常用的氣浮方法有：溶氣氣浮、電解氣浮和機械碎氣氣浮。植物油脂廠中目前采用的廢水預處理方式多為溶氣氣浮。采用氣浮去除油脂時，通常先投加混凝劑，中和或改變膠體粒子表面電荷，破壞乳化油的穩定性并形成絮凝體，投加混凝劑可使氣浮法的除油效率提高1倍[1]。

（三）混凝破乳

混凝破乳是在植物油脂廢水中加入破乳混凝劑，該混凝劑為無機高分子化合物，在水中解離后，能同時發揮粒子間吸附架橋與電中和作用，將膠體凝聚而沉淀。與一般的混凝劑藥劑相比具有優異的脫色功能，一次完成破乳與混凝過程。但是單靠使用破乳混凝劑進行廢水預處理，則存在破乳混凝劑投加量大，聚析以及沉降分離的時間長，設備占地面積大等問題。

（四）水解法

生物水解法是對油脂廢水進行厭氧預處理的工藝，主要用于處理濃度較高的油脂廢水。生物水解法能夠去除油脂廢水中的有機物，該工藝將有機物的厭氧分解始終控制在水解、酸化階段，利用水解菌和產酸菌將廢水中的大分子、難降解的有機物降解為小分子有機物。該方法操作管理較方便，抗沖擊負荷能力強，占地面積小，工程投資小，目前該工藝已被廣泛應用于植物油脂廢水的預處理。

四、二級處理技術

（一）厭氧處理

厭氧工藝既可以處理高濃度有機廢水、也可以處理低濃度有機廢水，應用范圍廣。目前常用的厭氧處理工藝有升流式厭氧污泥床（UASB），厭氧生物濾床（AF）和厭氧復合床（AFB）等，厭氧處理后出水COD濃度較高，仍需進行好氧處理，提高出水水質。

雖然厭氧處理工藝在國內植物油廠廢水處理中已有多項工程投入運行，但目前國內已有的生物處理工藝大部分還是好氧處理工藝。究其原因，一是厭氧法存在啟動時間長，操作管理復雜等缺點；二是對于中小型油廠，生產規模較小，因此廢水處理工程也較小，工藝產生的沼氣量少而無法利用，處理較為困難，因而有專家建議在目前油脂廢水處理中采用厭氧工藝還需作周全的考慮[2]。

（二）好氧處理

好氧生物處理時目前植物油脂廢水處理中應用最多的工藝，目前油脂廢水處理中，好氧處理工藝較多采用活性污泥法、SBR法、生物膜法等.

1.活性污泥法

活性污泥法對COD 的去除率一般為80%，BOD5 為90%[3]，用來處理含脂類廢水時一般難以達到廢水綜合排放標準，其主要原因：一是游離脂肪酸在水中溶解度很差，含酸廢水酸化時，游離脂肪酸會形成黏滯的難以過濾的沉淀物，即使在相同pH 的溶液中，濾液中仍含有極限溶解度所允許的黏質，給水處理帶來很大的困難；二是傳統活性污泥法中，大部分微生物對中長碳鏈脂肪酸及油脂的直接分解能力低，對高濃度有機廢水的抗沖擊能力差，并且容易產生污泥膨脹等問題。因此不適用于中小型油廠廢水處理。

2.SBR法

SBR（Sequencing Batch Reactor），即間歇式活性污泥法，是近幾年國內外應用較為廣泛的生物處理技術。SBR 工藝集厭氧、好氧、沉淀處理于一池，它具有工藝簡單、經濟、處理能力強、耐沖擊負荷、占地面積少、運行方式靈活和不易發生污泥膨脹等優點，對于濃度高、水量小的廢水處理比較適合。

3.生物膜法

目前國內處理含脂類廢水時使用的好氧生物處理系統多采用生物膜工藝，現有的生物膜工藝包括生物接觸氧化、生物轉盤和生物流化床等，其中生物接觸氧化法應用最廣泛。

在相同運行條件下，生物膜系統處理效果優于活性污泥系統，其COD、BOD 和油脂去除率分別可達97%、99%和82%[4]，出水水質可達到廢水綜合排放二級標準。在相同的污染物去除率下，生物膜系統的運行管理更方便，抗沖擊負荷能力較強，并克服了活性污泥系統存在的一些問題，如污泥流失問題和污泥上浮現象。但生物膜法對脂類、SS、色度的去除有限，所以廢水在進入生物膜工藝前需要預處理。生物膜法工藝主要適用于含脂類廢水水量不大、場地較小的情況[5]。

五、結語

綜上所述，在預處理技術中，隔油、氣浮、水解法占地面積小、運行管理方便，可用于中小型油廠的廢水預處理，在二級處理工藝中，好氧處理中的SBR法和生物膜法適用于中小型油廠的二級處理。中小型油廠在選擇廢水處理工藝時，必須結合實際情況，綜合考慮各方面因素，慎重選擇適宜的處理工藝，以達到最佳的處理效果，同時將去除廢水中有機污染物與油脂回收結合起來，以達到較好的環境效益和經濟效益。

參考文獻：

[1]段艷平，代朝猛，曾科，等.含脂類廢水處理研究進展[J].工業水處理，2008.28（2）：18

[2]北京水環境技術與設備研究中心.三廢處理工程技術手冊[M].北京：化學工業出版社，2000.

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    2親和層析應用的常見方式

    首先,要選擇合適的樣品處理緩沖液以利于目標分子與配體的結合。將處理好的樣品上到親和層析柱上,與配體無相互作用或作用弱的分子從柱子上穿出;然后通過更改流動相的pH或添加競爭劑,使目標分子與配體解離從而被洗脫下來。根據目標分子的性質,可以通過紫外吸收、熒光、質譜等方法對其進行檢測。親和層析的分離過程簡單、快速,具有較高的選擇性,廣泛用于生物醫學和藥物分析中樣品的分離和預處理。另外,除了可以利用親和層析的吸附作用來富集目標分子外,同樣也可以利用親和層析來去除樣品中影響分析的分子。如在蛋白組學的研究中,可以用親和層析柱先去除白蛋白、IgG等高豐度蛋白,再研究低豐度蛋白[2]。

    3凝集素親和層析

    凝集素是一種非免疫來源的蛋白質,能識別并結合特定類型的糖基,廣泛分布于植物、動物和微生物中[3]。凝集素親和層析以偶聯了凝集素的基質為固定相,常用的凝集素有伴刀豆凝集素A(ConA)、麥胚凝集素(WGA)、榴蓮凝素等,它們能識別不同的糖基,廣泛用于分離和鑒定糖蛋白、糖肽、糖脂、寡糖[4]。

    4硼酸鹽親和層析

    硼酸鹽親和層析以硼酸鹽為配體。在堿性條件下,大多數硼酸鹽衍生物能與含順式二醇基團的糖或糖蛋白結合。在過去的幾十年中,臨床實驗室一直將其用于糖化血紅蛋白的定量。糖化白蛋白以及一些載脂蛋白也可以用類似的方法來分析研究[5]。T.Suksrichavalita等利用“點擊化學”(clickchemistry)的方法合成了新的硼酸鹽,可以用于分離糖蛋白如卵清蛋白和RNaseB[6]。將硼酸鹽和凝集素共同偶聯到基質上,可以更好的用于分離糖蛋白[7]。

    5免疫親和層析

    免疫親和層析是利用生物體內存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法。以抗體為配體,免疫親和層析可以用于分離純化激素、酶、多肽、病毒等[8]。在臨床實驗室,該方法已經被用于分析乙酰膽堿酯酶、聯苯胺、IgG、胰島素、轉鐵蛋白等[9]。以抗原或蛋白A/G為配體,可以對抗體進行純化。

    6金屬螯合親和層析